(Là nhà cung cấp đáng tin cậy, HANGZHOU JECI BIOCHEM cung cấp NAD-sản xuất ổn định,{1}}chất lượng cao (Nicotinamide Adenine Dinucleotide, CAS 53‑84‑9), cung cấp hỗ trợ nguyên liệu thô đáng tin cậy cho các ứng dụng xét nghiệm trao đổi chất và IVD. Sản lượng ổn định và kiểm soát chất lượng nghiêm ngặt khiến chúng tôi trở thành đối tác ưa thích để cung cấp NAD cấp-chẩn đoán.)
NAD (nicotinamide adenine dinucleotide) là một coenzym quan trọng hiện diện tự nhiên trong tế bào, tồn tại ở hai dạng: dạng oxy hóa (NAD⁺) và dạng khử (NADH). Nó có thể được chuyển đổi qua lại thông qua các phản ứng oxy hóa khử, điều chỉnh các quá trình sinh học khác nhau như chuyển hóa năng lượng tế bào và truyền tín hiệu. NAD tham gia vào các phản ứng enzyme quan trọng để nắm bắt những thay đổi của chất chuyển hóa và những bất thường về nồng độ NAD và NADH cũng như tỷ lệ của chúng có liên quan chặt chẽ đến sự xuất hiện và phát triển của nhiều bệnh. Vì vậy, nó đã trở thành một dấu hiệu quan trọng để xét nghiệm sinh hóa lâm sàng và sàng lọc bệnh sớm. Các sản phẩm NAD cấp-độ tinh khiết và{5}}độ ổn định cao-, được dùng làm nguyên liệu thô chính cho thuốc thử chẩn đoán in vitro (IVD) và bộ dụng cụ xét nghiệm trao đổi chất, đóng vai trò chính trong việc cải thiện độ nhạy phát hiện và độ tin cậy của kết quả.
Lịch sử phát triển chẩn đoán-Cấp NAD
Năm 1906, Arthur Harden phát hiện ra một “yếu tố coenzym bí ẩn” thúc đẩy quá trình trao đổi chất trong quá trình nghiên cứu quá trình lên men rượu ở nấm men (sau này được chứng minh là NAD).
Năm 1929, Hans von Euler-Chelpin đã xác định được cấu trúc dinucleotide của NAD.
Năm 1930, Otto Warburg đã làm sáng tỏ cơ chế oxi hóa khử giữa NAD và NADH, làm rõ rằng NADH thể hiện sự hấp thụ tia cực tím đặc trưng ở bước sóng 340 nm trong khi NAD không có sự hấp thụ ở bước sóng này, đặt nền tảng lý thuyết cho các thử nghiệm enzyme.
Năm 1948, Horecker và cộng sự. đã xác nhận hệ số tuyệt chủng mol của NADH ở bước sóng 340 nm, cho phép định lượng trực tiếp tốc độ phản ứng enzyme thông qua thay đổi độ hấp thụ [1].
Năm 1961, Oliver H. Lowry đã thiết lập phương pháp chu trình NAD(P)/H, tiên phong phân tích định lượng NAD(P)/H của mô/tế bào.
Từ năm 1962 đến năm 1963, Boehringer Mannheim (sau này được Roche mua lại) đã tung ra bộ thuốc thử dựa trên phương pháp phát hiện độ hấp thụ NADH 340 nm đối với lactate dehydrogenase (LDH), đạt được ứng dụng thương mại đầu tiên của NAD cấp độ chẩn đoán-làm nguyên liệu thô coenzym.
Năm 1973, Bernofsky và cộng sự. đã thiết lập nguyên tắc của hệ thống khuếch đại ADH-PES{3}}MTT (ADH-PES-hệ thống đo màu MTT) [2];同年, Kato et al. (Phòng thí nghiệm Lowry) đã phát triển phương pháp đạp xe enzyme ADH-MDH kép{9}}, cho phép phát hiện NAD/NADH có độ nhạy cao [3].
Kể từ đó, NAD cấp độ chẩn đoán đã trở thành nguyên liệu thô cốt lõi cho xét nghiệm sinh hóa thông thường và liên tục mở rộng sang các lĩnh vực tiên tiến như nghiên cứu dấu ấn sinh học của bệnh thoái hóa thần kinh, theo dõi chuyển hóa khối u và đánh giá lão hóa.
Kịch bản ứng dụng NAD cấp độ chẩn đoán -
Nguyên liệu thô cốt lõi cho chẩn đoán sinh hóa lâm sàng
① Phát hiện Lactate Dehydrogenase (LDH)
Nguyên tắc phát hiện:
Lactate+NAD+⟶LDHPyruvat+NADH+H+
Kịch bản ứng dụng: Khoa Tim mạch (chẩn đoán nhồi máu cơ tim cấp tính), Khoa Xét nghiệm lâm sàng (chẩn đoán thiếu máu tán huyết), Khoa Gan mật (đánh giá tổn thương tế bào gan), v.v.
Phạm vi bình thường của LDH: 140 - 280 U/L (người lớn, có sự khác biệt giữa các phương pháp)
Ý nghĩa lâm sàng: > 280 U/L (biểu thị tổn thương mô (gan, tim, thận, cơ, phổi, v.v.)), > 500 U/L (thường thấy trong nhồi máu cơ tim, thiếu máu tán huyết, khối u ác tính, nhiễm trùng nặng).
② Phát hiện Malate Dehydrogenase (MDH)
Nguyên tắc phát hiện:
Axit Malic+NAD+⟶MDHAxit Oxaloacetic+NADH+H+
Kịch bản ứng dụng: Thuốc thử lâm sàng (chẩn đoán bệnh ty thể), Lĩnh vực nghiên cứu khoa học (nghiên cứu chức năng ty thể), v.v.
Phạm vi bình thường của MDH: 12.5 - 50 U/L (các phòng thí nghiệm khác nhau có sự khác biệt nhỏ do phương pháp phát hiện và thuốc thử)
Ý nghĩa lâm sàng: Độ cao cho thấy tổn thương ty thể, hoại tử mô, v.v.
③ Phát hiện Isocitrate Dehydrogenase (ICDH)
Nguyên tắc phát hiện:
Axit Isocitric+NAD+⟶ICDH -Axit Ketoglutaric+NADH+H+
Kịch bản ứng dụng: Chẩn đoán bệnh ty thể lâm sàng, Lĩnh vực nghiên cứu khoa học (đánh giá tổn thương gan, nghiên cứu chuyển hóa năng lượng), v.v.
Phạm vi bình thường của ICDH: 1 - 5 U/L (huyết thanh)
Ý nghĩa lâm sàng: Độ cao cho thấy tổn thương ty thể, tổn thương tế bào gan, hoại tử mô, v.v.
④Phát hiện creatine Kinase (CK)
Nguyên tắc phát hiện:
Phosphocreatine+ADPGlucose+ATPG-6-P+NAD+⟶CKCreatine+ATP⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Tình huống ứng dụng: Khoa Tim mạch (nhồi máu cơ tim cấp tính, viêm cơ tim), Khoa Chỉnh hình/Cấp cứu (chấn thương cơ, tiêu cơ vân), Thần kinh (bệnh cơ), v.v.
Phạm vi bình thường của CK: Nam 38 - 174 U/L; Nữ giới 26 - 140 U/L (sự khác biệt giữa các phương pháp)
Ý nghĩa lâm sàng: Nồng độ tăng cao cho thấy tổn thương cơ tim hoặc cơ xương, thường thấy trong nhồi máu cơ tim, viêm cơ tim, tiêu cơ vân, tập thể dục gắng sức, v.v.
⑤Phát hiện glucose
Nguyên tắc phát hiện:
Glucose+ATPG-6-P+NAD+⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Kịch bản ứng dụng: Nội tiết (chẩn đoán bệnh tiểu đường và theo dõi đường huyết), Khoa Cấp cứu (hôn mê hạ đường huyết, chẩn đoán cấp cứu tăng đường huyết), Y học Chăm sóc Quan trọng (theo dõi đường huyết của bệnh nhân ICU), v.v.
Mức đường huyết bình thường: Lúc đói 3.9 - 6.1 mmol/L; Sau bữa ăn 2 giờ < 7,8 mmol/L
Ý nghĩa lâm sàng: Nồng độ tăng cao được thấy trong bệnh tiểu đường, tăng đường huyết do căng thẳng; Mức độ giảm được thấy trong hạ đường huyết, insulinoma, bệnh gan nặng, v.v.
⑥Phát hiện Lactate
Nguyên tắc phát hiện:
Lactate+NAD+⟶LDHPyruvat+NADH+H+
Tình huống Ứng dụng: Khoa Cấp cứu (đánh giá tình trạng sốc/thiếu oxy mô), ICU (đánh giá sau cấp cứu - bệnh nhân nguy kịch), Khoa Tim mạch (suy tim), Bệnh Truyền nhiễm (nhiễm trùng huyết), Y học Thể thao (đánh giá năng lực thể chất của vận động viên), v.v.
Phạm vi bình thường của Lactate: 0.5 - 2.2 mmol/L (máu tĩnh mạch)
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑦ Phát hiện galactose
Nguyên tắc phát hiện:
-D-galactose+NAD+⟶GalDHAxit galacton+NADH+H+
Kịch bản ứng dụng: Sàng lọc sơ sinh (Chẩn đoán bệnh Galactosemia), Nhi khoa (Các lỗi chuyển hóa bẩm sinh), Tiêu hóa (Xác định tình trạng không dung nạp Lactose), Gan học (Đánh giá chức năng gan), v.v.
Phạm vi bình thường của Galactose: Huyết thanh lúc đói: < 0,28 mmol/L; Trẻ sơ sinh: < 1,11 mmol/L
Ý nghĩa lâm sàng: Nồng độ tăng cao gặp trong galactose huyết, suy gan, thiếu men chuyển hóa galactose bẩm sinh, v.v.
⑧ Phát hiện Ethanol
Nguyên tắc phát hiện:
Ethanol+NAD+⟶ADHAxetaldehyt+NADH+H+
Kịch bản ứng dụng: Khoa Cấp cứu (Chẩn đoán ngộ độc rượu cấp tính), Trung tâm kiểm tra thể chất (Kiểm tra nồng độ cồn của tài xế), Nhận dạng pháp y (Đo nồng độ cồn trong máu), v.v.
Phạm vi bình thường của Ethanol: 0 mmol/L (Người không{1}}uống rượu)
Ý nghĩa lâm sàng: Mức độ tăng cao cho thấy việc sử dụng rượu hoặc ngộ độc rượu; nồng độ quá cao có thể dẫn đến suy nhược hệ thần kinh trung ương, ức chế hô hấp và tuần hoàn.
⑨ -Phát hiện hydroxybutyrate
Nguyên tắc phát hiện:
-Axit hydroxybutyric+NAD+⟶ -HBDHAxit acetoacetic+NADH+H+
Kịch bản ứng dụng: Nội tiết (Chẩn đoán bệnh đái tháo đường do nhiễm toan ceton), Dinh dưỡng (Theo dõi chế độ ăn uống), v.v.
Phạm vi bình thường của -Hydroxybutyrate: Máu lúc đói: < 0,27 mmol/L (Sự khác biệt giữa các phương pháp)
Ý nghĩa lâm sàng: Mức độ tăng cao cho thấy tình trạng nhiễm toan ceton do tiểu đường, tình trạng đói,- nhịn ăn lâu dài, nhiễm toan ceton do rượu, v.v.
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑨ -Phát hiện axit hydroxybutyric
Nguyên tắc phát hiện:
-Axit hydroxybutyric+NAD+⟶ -HBDHAxit acetoacetic+NADH+H+
Kịch bản ứng dụng: Nội tiết (Chẩn đoán bệnh tiểu đường nhiễm toan ceton), Dinh dưỡng (Theo dõi chế độ ăn kiêng), v.v.
Phạm vi bình thường của axit -hydroxybutyric: Máu lúc đói: < 0,27 mmol/L (Sự khác biệt giữa các phương pháp)
Ý nghĩa lâm sàng: Mức độ tăng cao cho thấy tình trạng nhiễm toan ceton do tiểu đường, tình trạng đói,- nhịn ăn lâu dài, nhiễm ceton do rượu, v.v.
Dấu ấn sinh học để đánh giá bệnh
NAD, với vai trò là dấu ấn sinh học để đánh giá bệnh, hiện đang trong giai đoạn dịch bệnh lâm sàng. Vào năm 2022, Bộ phát hiện NAD⁺/NADH máu Q-NADMED của NADMED đã trở thành sản phẩm phát hiện NAD đầu tiên trên thế giới đạt được chứng nhận CE-IVD (Chỉ thị về thiết bị y tế chẩn đoán trong ống nghiệm). Nó phát hiện nồng độ NAD⁺ và NADH trong máu toàn phần của con người, với giới hạn phát hiện của NAD⁺: 330 nM; NADH: 119 nM. Nồng độ NAD⁺ trong máu toàn phần của người trưởng thành khỏe mạnh là khoảng 18 μM (phạm vi: 15–23 μM) [4], được sử dụng để phát hiện định lượng máu toàn phần và theo dõi tác dụng điều trị tiền chất NAD. Tuy nhiên, nó vẫn chưa được chấp thuận như một tiêu chuẩn chẩn đoán bệnh độc lập.
Trong lĩnh vực nghiên cứu khoa học, giá trị tiềm năng của tỷ lệ NAD/NADH trong dịch não tủy hoặc máu trong các bệnh thoái hóa thần kinh (ví dụ bệnh Alzheimer, bệnh Parkinson), chuyển hóa khối u và đánh giá lão hóa đang được nghiên cứu sâu [5−8], nhưng hiện nay nó chủ yếu được áp dụng trong các thử nghiệm lâm sàng và khám phá nghiên cứu khoa học, thay vì chẩn đoán lâm sàng thông thường.
>Bối cảnh thị trường của cấp độ chẩn đoán{0}}NAD<
Hiện tại, thị trường NAD cấp độ chẩn đoán toàn cầu-đang trong giai đoạn phát triển nhanh chóng nhờ sự tăng trưởng về công nghệ và nhu cầu. Ngành này đang nhanh chóng chuyển đổi từ-nhập khẩu chiếm ưu thế sang thay thế trong nước. Lĩnh vực chẩn đoán in vitro cho thấy sự khác biệt về cấu trúc: mặc dù tổng số bộ thuốc thử đã giảm nhưng các doanh nghiệp hàng đầu (ví dụ: Roche Diagnostics, Mindray Medical) vẫn ổn định và mở rộng sang các dự án mới như thử nghiệm trao đổi chất và đánh giá lão hóa, trong khi các doanh nghiệp vừa và nhỏ-giảm dây chuyền sản xuất do áp lực lợi nhuận.
Các nhà cung cấp chính của NAD cấp độ chẩn đoán{0}} bao gồm: Roche, Oriental Yeast, SunClone Bio, Thâm Quyến Bangtai, v.v.
Tài liệu tham khảo
[1] HORECKER BL, KORNBERG A. Các hệ số tuyệt chủng của dải nucleotide pyridin giảm [J]. J Biol Chem, 1948, 175(1): 385 - 90.
[2] BENFORSKY C, SWAN M. Một xét nghiệm đạp xe cải tiến đối với nicotinamide adenine dinucleotide [J]. Hóa sinh hậu môn, 1973, 53(2): 452 - 8.
[3] KATO T, BERNTSEN O, CARTER S, và những người khác. Một phương pháp đạp xe bằng enzyme để tạo ra nicotinamide - adenine dinucleotide với malic và rượu dehydrogenase [J]. Hóa sinh hậu môn, 1973, 56(2): 392 - 8.
[4] NATALIA V Balshova, Lev G Zavileysky, Artem V Artukhov, và những người khác. Xét nghiệm hiệu quả và đánh dấu Ý nghĩa của NAD⁺ trong máu người[J]. Mặt trận Med, 2022, 9, 886645.
[5] LAN Z P. Một hệ thống phát hiện dấu ấn sinh học mới và ứng dụng của nó ở Trung Quốc [Bằng sáng chế]. Trung Quốc, 119560018A[P]. 2024 - 11 - 12.
[6] YAN L, SUN MR, WU J, và cộng sự. Một loại đầu dò huỳnh quang để phát hiện các nucleoside pyrimidine cũng như phương pháp điều chế và ứng dụng của nó: Trung Quốc, 117887460A[P]. 2025 - 09 - 02.
[7] JIN LP, ZHAO X, LU Y, và cộng sự. Xác định nhiễm sắc thể của Nicotinamide Adenine Dinucleotide và các chất chuyển hóa của nó bằng cách sử dụng Pyridine Nucleoside làm đồng yếu tố và ứng dụng của nó trong chẩn đoán hoặc điều trị chất lỏng lên men [J]. Trung Quốc, 112694070A[P]. 2023 - 12 - 22.
[8] HONG J, HAN ZW, NING XQ, và cộng sự. Ứng dụng NAD⁺ làm chất đánh dấu phân tử để phát triển tùy chỉnh các sản phẩm nhằm chẩn đoán sự khó chịu ở cơ quan sinh dục nữ[J]. Trung Quốc, 118109777A[P]. 2024 - 05 - 10.
